Distinta distribución intracelular de la proteína sigma a de los reovirus aviares en céulas de diferentes especies

Résumé

En este trabajo analizamos la localización intracelular de la proteína sigma A en células aviares infectadas y transfectadas y encontramos que sigma A se localiza en el nucleolo y en el citoplasma de células aviares y que su presencia en el nucleolo es independiente de factores virales y de las modificaciones que induce la infección viral. También encontramos que la proteína sigma A se localiza en el nucleoplasma de células de mamífero, y experimentos realizados con células permeabilizadas con digitonina indicaron que se mantiene arrestada en el nucleoplasma por interacción con factores celulares específicos de células de mamífero. Por otra parte, estudiamos el transporte de la proteína sigma A al núcleo de la célula y demostramos que sigma A penetra en el núcleo por un mecanismo de transporte selectivo y no por difusión pasiva. Sin embargo, la entrada de sigma A al núcleo no sigue la ruta clásica dependiente de importinas y de secuencias NLS, sino que alcanza el núcleo por un mecanismo independiente de factores citosólicos y de energía. También observamos que la proteína sigma A expresada en células Vero no recircula entre el núcleo y el citoplasma y que su presencia en el núcleo es dependiente del estado transcripcional de la célula. También demostramos que sigma A utiliza el receptor Crm1 para salir del núcleo de células Vero cuando se inhibe la transcripción. Por último, hemos demostrado que la proteína sigma A se asocia y colocaliza en el interior de la célula con la nucleolina de mamífero y que induce su redistribución intracelular.