Nuevos desarrollos metodológicos para su aplicación de toxinas de cianobacterias de aguas dulces

Résumé

Las cianobacterias son organismos productores de toxinas de diversos tipos, entre las que se encuentran las microcistinas, péptidos cíclicos de elevada toxicidad a nivel hepático, que han sido responsables de diversos episodios tóxicos, llegando a provocar la muerte de humanos y animales. Debido al riesgo que implica la preencia de estas potentes toxinas en aguas destinadas al consumo, los objetivo sde este trabajo se han centrado en la búsqueda de metodologías analíticas para su determinación sensible y selectiva a los bajos niveles a los que pueden presentr toxicidad. Por una parte se han optimizado las etapas de preparación de la muestra, tales como extracción y purificacion, para su aplicación a muestras naturalmente contaminadas. En este caso se han utilizado tanto procedimientos convencionales de extracción en fase sólida, como la cromatografía de inmunoafinidad, llevándose a cabo la evaluación de dichas etapas mediante la técnica de Cromatrografía de Líquido de Alta Eficacia con detección Ultravioleta. Por otra parte se desarrolló, optimizó y evaluó la aplicación de una técnica de reciente desarrollo como es la Elctroforesis Capilar de Alta Eficacia con detección Ultravioleta como alternativa a la Cromatografía de Líquido para el análisis de microcistina. Finalmente se utilizó la Espectrometría de Masas acopladas a la Electroforesis Capilar como técnica utilizada para la confirmación de los resultados obtenidos previamente. Las conclusiones más relevantes obtenidas a partir de los estudiados realizados fueron las siguientes: La preparación de la muestra es un paso crítico para la determinación eficaz de las microcistinas presentes en muestras naturalmente contaminadas. Los estudios desarrollados han permitido establecer un protocolo eficaz y sencillo para el análisis de microcistinas presentes tanto en muestras de aguas contamindas como en extractos de algas tóxicas. La inmunoafi