Caracterización analítica y aplicación de anticuerpos generados por vía quimiosintética

Abstract

En los últimos años ha habido avances significativos en el campo de la biotecnología para la producción de anticuerpos con fines terapéuticos. A dichos anticuerpos se le pueden realizar diversas modificaciones para convertirlos en herramientas más efectivas y eficaces. Como se describe en la introducción, hay numerosas vías de producción de anticuerpos, siendo la más significativas las que resultan de la generación de hibridomas y la tecnología de la conjugación de fragmentos de anticuerpos a diversos polímeros. Estas rutas tienen la desventaja de requerir un gran número de pasos en los cuales el anticuerpo puede ser modificado o puede generar mezclas homogéneas con los productos de la reacción, por lo que es necesario el estudio, en cada una de las etapas, de técnicas analíticas que aseguren que el anticuerpo generado posea las características ideales para su posterior aplicación. De esta manera, el objetivo principal de este proyecto se centra en el desarrollo de diferentes técnicas analíticas para caracterizar la separación, purificación e identificación de una inmunoglobulina humana no específica y sus fragmentos y la posterior aplicación de dichas técnicas a un anticuerpo específico. La comparación de las técnicas empleadas permitirá determinar cual es la apropiada para el uso futuro en la purificación de fragmentos y llevar a cabo el seguimiento de reacciones de conjugación. El objetivo general se desarrollará en las siguientes etapas: - desarrollo y optimización de técnicas de separación, electroforéticas y cromatográficas, que permitan purificar fragmentos de una inmunoglobulina humana no específica. Aplicación de estas tecncias para la purificación de fragmentos de una inmunoglobulina específica. - comparación y optimización de las técnicas de separación para determinar cual es la más adecuadas para la purificación y recolecta de fragmentos de inmunoglobulina no específica y específica, y seguimiento de la reacción de conjugación de fragmentos de anticuerpo a polímeros. - caracterización y confirmación mediante espectrometría de masas de la pureza de los fragmentos de anticuerpo y de los conjugados resultantes de la unión de fragmentos a polímeros.