PROTEINA DE FUSION GST-FUCOSIDASA CON ACTIVIDAD ENZIMATICA ALFA-L-FUCOSIDASICA. PROTEINA RECOMBINANTE ALFA-L-FUCOSIDASA HUMANA
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Inventores/as:
- ALEJANDRO LEONIDES DE CARLOS VILLAMARIN
- MARTINEZ ZORZANO, VICENTA SOLEDAD
- MONTENEGRO GREGORIO, DOLORES
- ALONSO RODRIGUEZ, ANA MARIA
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Universidade de Vigo
info
Universidade de Vigo
Vigo, España
ES2255347A1 (16-06-2006)
ES2255347B1 (16-05-2007)
P200301185 (21-05-2003)
Resumo
La invención se refiere a una proteína de fusión denominada GST-fucosidasa (GST-FUC), que presenta actividad enzimática alfa-L-fucosidásica, producida en la bacteria Escherichia coli mediante la expresión del plásmido recombinante pGEX-FUC. Este plásmido incluye una secuencia de cDNA que codifica la enzima alfa-L-fucosidasa humana insertada en el sitio BamHI del vector de expresión procariótico pGEX-2T, que incluye la secuencia de DNA codificante de la proteína glutatión S-transferasa (GST) del helminto Schistosoma japonicum. La proteína GST-FUC, purificada mediante cromatografía de afinidad, se digiere con la proteasa trombina para obtener la proteína recombinante alfa-L-fucosidasa humana. Estas proteínas recombinantes pueden ser utilizadas para la preparación de anticuerpos policlonales y monoclonales, así como para estudios estructurales.